Некоторые сведения о крови
Состав и функция крови. Кровь – жидкость красного цвета, состоящая из плазмы и взвешенных в ней форменных элементов (эритроциты, лейкоциты и тромбоциты). На плазму приходится 55 % объема крови, а форменные элементы составляют 45 %. Вязкость крови в 4–5 раз превышает вязкость воды. Общее количество крови взрослого человека составляет 7–8 % от веса тела, т. е. при весе 70 кг крови будет примерно 5 л. Плазма крови имеет слабощелочную реакцию (рН 7,36 – 7,5), содержит 6–8 % белков (альбумины, глобулины, липопротеиды, фибриноген), соль – 0,9 %, глюкозу – 0,1 % и 90–92 % воды.
Кровь обладает различными функциями:
1. Транспортная функция (кровь разносит по организму питательные вещества и доставляет продукты распада к органам выделения).
2. Обменная функция (участвует в газообмене, перенося кислород и углекислый газ).
3. Терморегулятивная функция (поддерживает стабильность температуры тела; кровь, нагреваясь в органах с высоким обменом веществ (мышцах, печени), переносит тепло к органам, где происходит теплоотдача (кожа)).
4. Защитная функция (уничтожает проникающие в организм болезнетворные бактерии и участвует в выработке иммунитета – невосприимчивости к инфекционным болезням).
5. Интеграционная функция (объединяет организм – переносит поступающие в него гормоны, метаболиты (продукты обмена веществ) и осуществляет химическое взаимодействие их в организме).
Функциональные показатели крови в Международной системе единиц (СИ):
Эритроциты в мкл 4–5 млн
Гемоглобин 130,0 – 160,0 г/л
Лейкоциты в мкл 4–9 тыс.
Тромбоциты в мкл 200–320 тыс.
Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) 2 – 10 мм/ч
Гематокрит (общий объем эритроцитов в цельной крови) 40–50 %
Общий белок 65–85 г/л
Глобулин 18–30 г/л
Альбумин 45–58 г/л
Белковый коэффициент (соотношение альбуминов к глобулинам) – А/Г 1,5–2,0
Фибриноген 2,0–4,0 г/л
Протромбиновый индекс 0,8–1,1
Остаточный азот 14,3 – 28,6 ммоль/л
Билирубин 8,5 – 20,5 мкмоль/л
Холинэстераза (ХЭ) 160–340 ммоль/л
Холестерин 3,0–6,2 ммоль/л
Сахар крови 3,5–7,2 ммоль/л
Креатинин 0,109 – 0,218 ммоль/л
Креатин 0,203 – 0,307 ммоль/л
Альдолаза до 1,2 ммоль/л
?-Амилаза (диастаза) 16–30 г/ч/л
Щелочная фосфотаза до 1,2 ммоль/л
Тимоловая проба 0–4,0 ед.
Мочевая кислота (без подготовки) 0,26 – 0,38 ммоль/л
Калий 3,6–5,4 ммоль/л
Натрий 130–150 ммоль/л
Кальций 2,0–2,75 ммоль/л
Фосфор (неорганический) 0,58 – 0,84 ммоль/л
Время свертывания крови 5 – 10 мин
Время кровотечения не более 4 мин
Цветной показатель 0,8–1,1
Группы крови и резус-фактор. В связи с кровопотерей, которая наблюдается при тяжелых ранениях или длительных операциях, издавна стоял вопрос о возмещении утраченной крови. С этой целью еще в XVII в. пытались переливать человеку кровь животных. В начале XIX в. начались попытки переливания крови от человека человеку. Эти попытки давали самые противоречивые результаты. Иногда больные поправлялись, а иногда перелитая кровь вызывала тяжелые осложнения вплоть до летальных исходов. Неблагоприятные исходы обусловлены были незнанием групп крови. Успешное переливание крови стало возможно благодаря открытиям в 1901 г. австрийским бактериологом К. Ландштайнером и в 1907 г. польским врачом Яном Янским наличия в крови человека специфических биологически активных белковых веществ: агглютиногенов А и В, находящихся в эритроцитах и агглютининов ? и ?, содержащихся в плазме крови. Таким образом, по различному сочетанию агглютиногенов и агглютининов все человечество можно разделить на четыре группы (табл. 3). Группа крови каждого человека постоянна, наследуется от родителей и не меняется с возрастом или болезнью. Кроме того, все группы крови являются равноценными, не влияют на физические и умственные способности человека.
Таблица 3. Распределение агглютиногенов и агглютининов в группах крови и их процентное соотношение
Такое процентное соотношение характерно для европейской России. В других географических зонах распределение групп крови среди населения имеет другую картину.
Рассматривая кровь под микроскопом, можно видеть, что она состоит из жидкой части (плазмы), в которой в большом количестве содержатся клетки крови – красные (эритроциты) и белые (лейкоциты) кровяные тельца. Эритроциты в крови находятся во взвешенном состоянии. Если смешать несовместимую кровь, то эритроциты начнут склеиваться в глыбки. Этот процесс склеивания эритроцитов называется агглютинацией. При агглютинации эритроциты разрушаются в плазме крови, в результате чего образуются ядовитые вещества, отравляющие организм. Если же кровь совместима, то перелитые эритроциты донора остаются во взвешенном состоянии в крови реципиента.
Определение групп крови основано на реакции агглютинации, т. е. при встрече одноименных агглютиногенов и агглютининов (А и ?, В и ?) происходит склеивание эритроцитов (агглютинация). На основании этого явления и проводят определение группы крови. Техника определения состоит в следующем. На сухой чистый белый планшет с лункообразными углублениями (или белую тарелку) капают по 1–2 капли чистыми пипетками стандартные гемагглютинирующие сыворотки всех групп крови. В первую лунку капают первую группу сыворотки, во вторую лунку – вторую и так далее. Каждый раз для новой сыворотки берут другую чистую пипетку. После этой подготовки обрабатывают четвертый палец левой кисти (как менее рабочий) этиловым спиртом (ногтевую фалангу ладонной поверхности) и прокалывают стерильным пером Дженнера (игла-скарификатор). Выдавливают одну каплю крови и капают на свободную лунку планшета. После чего на проколотый палец кладут ватку со спиртом и, согнув его, прижимают к ладони. А каплю крови разносят углом сухого чистого предметного стекла по лункам с сывороткой и размешивают. При этом каждый раз меняют угол стекла с тем расчетом, чтобы дважды одним углом не коснуться капли крови. Таким образом, получится четыре бледно-розовых однородных капли – смесь крови с сывороткой в соотношении примерно 1: 10. Слегка покачивая планшет, ждут 5 мин. Постепенно в некоторых каплях образуются ярко-красные точки – склеились эритроциты, появилась агглютинация. По наличию или отсутствию агглютинации в разных каплях оценивают результат. Могут быть следующие варианты. Ни в одной капле нет агглютинации, значит, исследуемая кровь I группы. Если агглютинация произошла в I и III каплях, значит, исследуемая кровь II группы. При наличии агглютинации в I и II каплях – исследуемая кровь III группы. Если же агглютинация появилась в I, II и III каплях – значит, перед нами кровь IV группы.
Гемагглютинирующая стандартная сыворотка – это дефибринированная плазма, которая готовится из крови человека. Она должна быть прозрачной, без осадка, на каждой ампуле должны быть обозначены группа, срок годности, дата и место изготовления, титр (1: 32). Чтобы избежать ошибки, гемагглютинирующие сыворотки, как правило, подкрашены нейтральным красителем. Каждой группе соответствует определенный цвет. Так, вторая группа имеет голубой цвет, третья – розовый, четвертая подкрашена в желтый цвет, а первая группа не подкрашена.
В последнее время для определения групп крови вместо стандартных гемагглютинирующих сывороток применяют Медиклоны. В набор входят Медиклоны анти-А, анти-В, анти-АВ, анти-А1. Их используют путем смешивания с исследуемой кровью. Наступление агглютинации выражается в отчетливо видимой реакции склеивания эритроцитов. В состав набора входят следующие реагенты:
Медиклон анти-А – 3 флакона по 5,0 мл;
Медиклон анти-В – 3 флакона по 5,0 мл;
Медиклон анти-АВ – 3 флакона по 5,0 мл;
Медиклон анти-А1 – 1 флакон по 7,5 мл.
Время наступления агглютинации эритроцитов не превышает 30 с.
Порядок проведения исследования крови на групповую принадлежность:
– необходимо промаркировать белую пластинку с лунками или планшет (фамилия, имя, отчество пациента и реагенты);
– нанести на планшет чистой пипеткой по одной большой капле (около 0,1 мл) Медиклоны анти-А, анти-В, анти-АВ. Рядом с каждой каплей реагента нанести по одной маленькой капле (0,01 мл) исследуемой крови;
– смешать отдельными чистыми стеклянными палочками каплю крови с соответствующим реагентом.
Мягко покачивая планшет, отмечают появление в первые секунды агглюцинации. В завершение процедуры делают заключение о принадлежности исследуемой крови к соответствующей группе.
Резус-фактор. В 1940 г. К. Ландштайнером и И. Винером был обнаружен еще один агглютиноген – резус-фактор (Rh). У 85 % людей в эритроцитах содержится белок D, т. е. они резус-положительны, а 15 % не содержат в эритроцитах этого фактора, их относят к резус-отрицательным. Этот признак, как и группа крови, является постоянным и не меняется на протяжении всей жизни. При отсутствии его у родителей он не может появиться у их детей. При групповой принадлежности агглютиногенам А и В в плазме крови соответствуют врожденные агглютинины ? и ?, а вот в противовес резус-фактору в плазме нет соответствующих врожденных антител (резус-агглютининов). Однако эти тела вырабатываются в плазме реципиента после переливания резус-положительной крови резус-отрицательному пациенту. Поэтому при переливании крови наряду с групповой принадлежностью необходимо учитывать и резус-фактор. Учет резус-принадлежности донора и пациента делает переливание крови более безопасным.
Оценка результатов агглютинации
Примечание: «+» – наличие агглютинации; «—» – отсутствие агглютинации; (серая заливка) – окончательное заключение о групповой принадлежности.
При беременности резус-отрицательной женщины с резус-положительным плодом в кровь матери поступает от плода белок D (резус-антиген). В ответ на это в плазме матери вырабатываются антитела. И если первая беременность может завершиться нормальными родами, то при повторной беременности с резус-положительным плодом наступает резус-конфликт. Конфликтуют резус-антиген плода (белок D) с антителами матери, выработанными в предыдущей беременности, что может привести к прерыванию беременности.